Альтернариатоксины как факторы риска нарушений клеточного иммунитета и дисбаланса цитокинового профиля (на примере экспериментальной модели in vivo)

Возможная контаминация альтернариатоксинами пищевой продукции определяет необходимость проведения исследований иммунотропного воздействия токсичных метаболитов для уточнения дозозависимых эффектов их воздействия.

Осуществлена оценка влияния тенуазоновой кислоты (ТеА) и экстракта альтернариатоксинов как факторов риска нарушений клеточного иммунитета и дисбаланса цитокинового профиля у крыс в эксперименте in vivo.

Эксперимент проводили на трех группах самцов линии Wistar со средней массой тела 238 г. Животные получали сбалансированный полусинтетический корм и очищенную воду (ad libitum). Крысам контрольной группы (1-я группа) однократно внутрижелудочно вводили 10%-ный водный раствор этилового спирта (растворитель) в количестве 3 мл/кг массы тела (м.т.); 2-й группы – раствор чистого препарата ТеА в дозе 30 мг/кг м.т.; 3-й группы – раствор экстракта среды культивирования гриба продуцента Alternaria alternata, содержащего смесь альтернари-атоксинов: ТеА (в дозе 30 мг/кг м.т.), альтернариола (AOH) (0,276 мг/кг м.т.) и его метилового эфира (AME) (0,902 мг/кг м.т.), тентоксина (TEN) (0,018 мг/кг м.т.). Вводимые крысам 2-й и 3-й групп растворы содержали адекватное контрольной группе количество этилового спирта. Через 24 ч после введения растворов крыс выводили из экс-перимента декапитацией с забором образцов крови. Гематологический профиль определяли на гематологическом анализаторе Coulter ACT TM 5 diff OV. Экспрессию рецепторов CD45R, CD3, CD4, CD8а, CD161 на лимфоцитах периферической крови крыс определяли методом прямого иммунофлуоресцентного окрашивания клеток цельной крови с использованием панели моноклональных антител на проточном цитофлуориметре FC-500. Содержание цитокинов: IFN-γ (интерферон-γ), IL-1β (интерлейкин-1β), IL-2, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17A, MCP-1 (моноцитарный хемоаттрактантный белок-1), MIP-1α (макрофагальный воспалительный белок-1α) и TNF-α (фактор некроза опухоли альфа) в плазме крови определяли методом мультиплексного иммуноанализа на анализаторе Luminex 200.

Результаты исследования свидетельствуют о провоспалительном эффекте внутрижелудочного введения крысам ТеА как в виде монокомпонента, так и в составе экстракта среды культивирования Alternaria alternata. Использованные в работе альтернариатоксины способны индуцировать системные воспалительные реакции, идентифицированные по возрастанию содержания В-лимфоцитов, ответственных за гуморальный иммунитет, и уве-личению уровней в плазме крови провоспалительных, апоптогенных цитокинов: TNF-α, IL-1β, IFN-γ, IL-6, IL-10, IL-2, IL-5, IL-17A и хемокинов MIP-1α и MCP-1. Введение ТеА приводит к снижению уровней противовоспалительных IL-5 и IL-10, что может быть следствием снижения активности Treg (Т-регуляторных) лимфоцитов, под-твержденного уменьшением величины соотношения IL-10/IL-17A.